一区二区视频在线观看高清视频在线-一区二区三区无码高清视频-一区二区三区无码被窝影院-一区二区三区四区国产-久久re视频精品538在线-久久re热在线视频精99

產品目錄 Product catalog
聯系我們 Contat Us

北京恒奧德儀器儀表有限公司
聯系人:王蕊
公司郵箱:2272048995@qq.com
辦公地址:北京市海淀區富海中心

技術文章首頁 > 技術文章 > 恒奧德儀器紫外分光光度計儀器組成 測定方法
恒奧德儀器紫外分光光度計儀器組成 測定方法
點擊次數:1116      更新時間:2023-03-20

恒奧德儀器紫外分光光度計儀器組成 測定方法

 

儀器組成

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。

光譜范圍

包括波長范圍為400~760 nm的可見光區和波長范圍為200400 nm的紫外光區。不同的光源都有其*的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。

分光光度計圖片

分光光度計圖片(4)

鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

氫燈(或氘燈)的發射光譜:氫燈能發出185400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源。

 

蛋白質的直接定量(UV法)

這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在些雜質,般要消除320nm 背景"信息,設定此能"。與測試核酸類似,要求A280的吸光值至少大于0.1A,佳的線性范圍在1.0-1.5 之間。實驗中選擇Warburg 公式顯示樣品濃度時,發現讀數漂移"。這是個正常的現象。事實上,只要觀察A280的吸光值的變化范圍不過1%,表明結果非常穩定。漂移的原因是因為Warburg 公式吸光值換算成濃度,乘以定的系數,只要吸光值有少許改變,濃度就會被放大,從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單的蛋白質。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較。

比色法蛋白質定量

蛋白質通常是多種蛋白質的混合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。

測定方法

比色方法

般有BCA,BradfordLowry 等幾種方法。

Lowry 法:以早期的Biuret 反應為基礎,并有所改。蛋白質與Cu2 反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret 相比,Lowry 法敏感性更。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTATriton x-100ammonia sulfate 等物質的蛋白不適合此種方法。

BCABicinchoninine acid assay)法:這是種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2 反應產生Cu ,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系較強,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。

Bradford 法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其大的特點是,敏感度好,是Lowry BCA 兩種測試方法的2 倍;操作更簡單,速度更快;只需要種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與系列干擾LowryBCA 反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。主要的缺點是不同的標準品會導致同樣品的結果差異較大,無可比性。


主站蜘蛛池模板: 无码日韩人妻精品久久蜜桃免费天天| 中文字幕综合亚洲国语对白| 亚洲精品国产手机又又又又又又又| 亚洲高清国产拍精品闺蜜合租国产成人亚洲综| 亚洲婷婷中文字幕精品色| 爽爽影院av入口| 精品国产91九色精品导航| 中文字幕亚洲一区| 三上悠亚在线网站址| 国产高清视频在线观看97叶| 亚洲午夜久久久精品影院00 | 亚洲高清国产拍精品嫩草影院,太粗太硬 | 精品无码国产污污污免费网站密桃 | 东京热本道五月天| 亚洲国产一二三精品无码绿巨人南波杏| 麻豆久久久9性大片大香蕉| 草莓视频在线观看国产免费专区| 亚洲精品国产综合久久一线锤子 | 亚洲国产一二三精品无码不卡 站长工具 | 天天天天甜你的天天念你| 国产在线观看无码视频一二区| 一区二区三区四区在线视频| 久久久天堂国产精品女人| 18禁真人抽搐一进一出在线伪娘| 人妻少妇精品中文字幕av-| 成色好的y31s是国产| 色噜噜精品97又粗又大| 成全动漫视频在线观看免费高清版下载亚洲一区二区 | 肉色丝袜和黑色丝袜哪个防晒效果好| 国产高清乱码又大又圆_超薄肉色丝袜一区二区_ | 超污网站在线观看抖阴极速版| 我的两个丫头的说说| 成人黄色在线网站变态| 日韩欧美超碰一二三四i| 18禁裸体动漫美女无遮挡网站动漫 | 国产一二线无码福利| 无码乱人伦一区二区亚洲 - 无敌| 国产成人精品三级在线观看_ | 免费精品一区二区三区第35二区发现| 中字无码av观看| 精品国产亚洲一区二区三区久久久久久久久 |