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解析分光光度計儀器組成原理操作方法
點擊次數:1906      更新時間:2022-01-05

解析分光光度計儀器組成原理操作方法

 

 

 

儀器組成

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃

原理

分光光度計采用個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

I0為入射的單色光強度;

I 為透射的單色光強度;

T 為物質的透射率;

k 為摩爾吸收系數;

L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;

c 為物質的濃度;

 

操作方法

1.接通電源,打開儀器開關,掀開樣品室暗箱蓋,預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至“1"檔(若零點調節器調不到“0"時,需選用較。)

3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內,使空白管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態下調節零點調節器,使讀數盤針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋,調節“100"調節器,使空白管的t=100,針穩定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。

7.比色畢,關上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈


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